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Cultura de Células e Tecidos


Área Científica: Biologia e Bioquímica
Ano: 3º
Semestre: 1
Créditos: 6,5 ECTS
Horas de contacto: 30 T, 39 PL, 6 S, 20 OT

Objectivos/Competências adquiridas:

Introduzir os conceitos biológicos básicos subjacentes à técnica de cultura de células e tecidos in vitro (totipotência celular, desdiferenciação e morfogénese). Distinguir entre os aspectos científicos e as aplicações práticas da cultura de células e tecidos vegetais. Definir as aplicações e utilidade prática da Cultura de Células. Estudar as aplicações da CCVegetais na produção de plantas melhoradas e síntese de novos produtos, em produção agrícola, florestal e Indústrias biotecnológicas e da CCAnimais em diagnóstico pré-natal, reprodução assistida, medicina regenerativa, imunologia, farmacologia, produção animal e veterinária entre outras. Permitir que os alunos tomem contacto com algumas técnicas e equipamentos laboratoriais específicos da Cultura de Células. Praticar metodologias de laboração em assepsia e contactar com diferentes técnicas de cultura in vitro de plantas. Sensibilizar para os limites do uso da técnica e para as repercussões ambientais vs. utilidade e uso com fins ambientais. Introduzir os problemas éticos inerentes às novas tecnologias. Incentivar a discussão dos aspectos bioéticos da Cultura de Células e Tecidos.

Conteúdo da unidade curricular:

História e fundamentos da cultura de células e tecidos: Totipotência celular, Desdiferenciação e Organogénese.
Cultura de Células Vegetais: Totipotência celular, desdiferenciação e organogénese. Condições de cultura e seus efeitos fisiológicos. Tipos de cultura e suas aplicações. Morfogénese directa e indirecta. Embriogénese somática directa e indirecta. Produção de semente artificial. Cultura de anteras e pólen para produção de haplóides Cultura de protoplastos e produção de híbridos somáticos. Microenxertia. Variação somaclonal e variação epigenética. Culturas in vitro de órgãos, tecidos e células em suspensão. Cultura de células e engenharia genética - transformação de plantas. Aplicações à produção de plantas melhoradas e síntese de novos produtos. Aplicação da CCV em produção agrícola, florestal e Indústrias biotecnológicas.
Cultura de Células Animais: Biologia das Células Animais: Interacções celulares. Cultura e Subcultura de Células Animais: Isolamento, Culturas primárias, Linhas celulares. Evolução e manutenção de Linhas Celulares Finitas (LCF) e Contínuas (LCC). Transformação de Células Animais in vitro. Clonagem de Células Animais. Caracterização de Linhas Celulares: Análise de cariótipos. Scaling-Up de cultura de Células Animais. Aplicações. Bioensaios.
Conteúdos Práticos: 1 - Introdução ao material e equipamento laboratorial de cultura in vitro; 2 - Manutenção de condições assépticas; 3 - Composição e preparação de meios de cultura; 4 - Indução de desdiferenciação. 5 - Multiplicação de plantas por micropropagação. 6 - Culturas em meio líquido; 7 - Embriogénese somática. 8 - Indução de morfogénese em calli e directa. 9 – Bioensaios; 10 - Tratamento dos resultados.

Bibliografia recomendada:

Chawla H. S (2004) - Plant Biotechnology. A Practical Approach. Science Publishers.
Freshney, R. I. (1994). “Culture of Animal Cells - A Manual of Basic Technique”, 3rd Edition. Wiley-Liss New York.
Gamborg, O.L. and G. C. Phillips (eds). (1995) - Plant Cell, Tissue and Organ Culture. Springer Lab Manual.
Loyola-Vargas, Victor M, Felipe Vasquez (2005) – Plant Cell Culture Protocols. In Methods in Molecular Biology Series. Scientific and Medical Publishers.
Maarten J., Crispeels & David E. Sadava (2003) - Plants, Genes and Crop Biotechnology 2th Edition. Jones and Bartlett Publishers.
Masters, J. R. W. (2000). Animal Cell Culture, 3rd Edition. Oxford University Press.
S. Bhojwani and W-Y Soh (Eds) (2003) - Agrobiotechnology and Plant Tissue Culture. Science Publishers.
Shivramiah Shantharam and Jane F Montgomery (Eds.) (1999) - Biotechnology, Biosafety and Biodiversity: Scientific and Ethical Issues for Sustainable Development. Animal and Plant Health Inspection Service, USDA, Science Publishers, Inc. USA
Vienne, Dominique de (ed.) (2003) - Molecular Markers in Plant Genetics and Biotechnology. Institute National de la Recherche Agronomique, Versailles, France


T = teóricas; TP = teórico-práticas; PL = ensino prático e laboratorial; TC = trabalho de campo; S = seminário; E = estágio; OT = orientação tutória;